Techniques de fécondation in vivo

Dans l’insémination intra-utérine homologue le liquide séminal du partenaire préalablement traité au laboratoire pour obtenir une sélection et une concentration adéquate des spermatozoïdes est déposé directement à l'intérieur de la cavité de l’utérus (IUI) par un cathéter, au moment de l'ovulation. Le jour fertile est déterminé par des dosages LH et d'œstradiol dans le sang et des monitorages échographiques de l'ovulation.
Les inséminations peuvent être associées, dans des cas sélectionnés, à une stimulation ovarienne pour obtenir une croissance folliculaire multiple, en augmentant ainsi les probabilités de réussite.
Dans l’insémination intra-utérine hétérologue l’on met en acte la même procédure avec le liquide séminal d'un donateur , dans le cas où elle soit indiquée.

GIFT (Gamete Intra Fallopian Transfert) est une technique particulière selon laquelle des spermatozoïdes et des ovocytes sont introduits dans la trompe, où se produit normalement le processus de fécondation in vivo. La préparation pour le patient est semblable à celle qui est illustrée dans les techniques de fécondation in vitro à une exception près : l'intervention se fait dans la salle opératoire, par voie laparoscopique, sous anesthésie générale, en hospitalisation de jour (Day Hospital). Même dans ce cas le liquide séminal sera celui du partenaire ou celui d'un donateur sur la base de l'indication.

Techniques de fécondation in vitro

Pour pouvoir exécuter des inséminations in vitro, une séquence de traitements est nécessaire comme : l'induction de l'ovulation, le prélèvement des ovocytes, la fécondation in vitro selon des différentes procédures, le développement de l'embryon en culture et son transfert dans l’utérus.
Pendant l'induction de l'ovulation, l’on utilise des médicaments pour stimuler les ovaires à produire plus d'ovocytes mûrs. On peut ainsi obtenir plus de zygotes et augmenter les chances de grossesse en pouvant répéter plusieurs fois le transfert embryonnaire, suite à une seule stimulation ovarienne et à un seul prélèvement ovocytaire.
La synchronisation du traitement est un élément crucial dans les pratiques de fécondation assistée. Même dans ce cas l'on exécute des dosages modelés de LH et d'œstradiol associés à des contrôles échographiques pour établir quand le processus de maturation folliculaire s'est produit (environ 12/24 heures avant l'ovulation). À ce stade, on pratique une injection de hCG qui, en simulant le pic ovulatoire de LH, entraîne au bout de 34-36 heures, la maturation finale des ovocytes.
Les ovocytes sont prélevés des follicules, sous l’assistance échographique, par aspiration avec une aiguille spéciale positionnée sur la sonde trans-vaginale. La ponction des ovaires se produit sous anesthésie locale et ne dure que quelques minutes. Les ovocytes obtenus sont apportés au laboratoire pour la fécondation avec le sperme. Dans la FIVET (Fécondation In Vitro et Transfert Embryonnaire), le sperme qui peut être celui d’un partenaire ou d’un donateur, selon les indications, est traité de façon à sélectionner les spermatozoïdes à motilité optimale. Les gamètes (ovocytes et spermatozoïdes) sont ainsi cultivés dans les milieux de culture et la fécondation se produit spontanément in vitro.
Il est possible de procéder, en tant que solution alternative à FIVET, à l’ ICSI (Intracytoplasmic Sperm Injection – Injection de sperme intracytoplasmatique) une pratique qui consiste à injecter un seul spermatozoïde à l'intérieur de l'ovocyte. Ce traitement est indiqué en présence d’une grave stérilité masculine. Au bout de 16-20 heures il est possible de s’assurer si la fécondation s’est produite avec la formation des zygotes.
Deux zygotes sont conservés en culture pour 48-72 heures avant d’être transférés dans l’utérus au stade d'embryons (4-8 cellules). Les zygotes restants seront cryoconservés pour de futurs possibles transferts dans l’utérus.

Il est également possible d’effectuer une ICSI d'ovocytes cryoconservés dans les cas où, pour plusieurs raisons, on a dû surgeler les ovocytes issus de la ponction folliculaire. On procède à leur fécondation en pratiquant une micro-injection d'un seul spermatozoïde (ICSI) à l'intérieur de l'ovocyte. Du fait de leur conformation, les ovocytes sont moins résistants aux procédures de congélation et décongélation ; les possibilités de réussite de cette solution sont donc considérablement inférieures aux possibilités d'une ICSI avec des ovocytes que l’on vient de collecter.
Le transfert est la procédure de réinsertion dans l’utérus des embryons (pas plus que deux) qui se sont adéquatement développés in vitro. Le transfert se produit par voie vaginale à l’aide d’un cathéter fin et c’est une procédure indolore qui ne dure que quelques minutes.
Le transfert se produit normalement lorsque l'embryon a atteint un stade de 4-8 cellules ou bien 48-72 heures après le prélèvement des ovocytes.
En cas de transfert avec des zygotes cryoconservés, ceux-ci sont décongelés et conservés en culture 1 ou 2 jours avant le transfert.

Dans quelques cas, face à une absence de spermatozoïdes dans le liquide séminal, il est opportun d’aller les chercher au niveau des épididymes ou des testicules. On fait alors appel à des techniques telles que la MESA (Microsurgical Epididymal Sperm Aspiration - Aspiration de sperme épididymal par microchirurgie) ou la TESE (Testicular Sperm Extraction – Extraction de sperme testiculaire). Les deux interventions se déroulent dans la salle opératoire sous anesthésie générale, en hospitalisation de jour Day Hospital.